Опухоль удаляют с последующим ее измельчением

На сегодняшний день, данный способ является одним из самых эффективных при злокачественных солидных новообразованиях. Постоянно ведутся работы, направленные на повышение функциональной активности эффекторных клеток. В настоящее время они связаны с генной инженерией. В лабораториях разных стран мира проводятся попытки трансдукции в ЛИО различных генов (интерферонов, интерлейкинов, ФИО и др.) с целью, во-первых, повышения их литических функций, а во-вторых, придания этим клеткам свойств продуцентов биологически активных веществ, оказывающих выраженный иммунотропный и противоопухолевый эффект.

Основные способы и этапы получения ЛАК и ЛИО для адоптивной терапии подробно изложены в работах Т. Whiteside и R.B. Herberman (1993), Е.М. Elder и Т. Whiteside (1993). Так, с помощью клеточного сепаратора Fenwall CS-3000 от больных с опухолями можно получать 10 109 мононуклеарных клеток, содержащих 80-90 % лимфоцитов и менее 2 % гранулоцитов. При необходимости проводят обогащение взвеси клетками той или иной субпопуляции через специфическую адгезию с помощью моноклональных антител либо методами прилипания к ластику. В дальнейшем эти клетки культивируют в больших пластиковых флаконах в концентрации 2-10 106/мл в среде с глутамином, антибиотиками, АВ-сывороткой человека и ИЛ-2 в дозе 1000 Getus ед/мл в течение 3-5 сут. Подсчет клеток в культуре осуществляется ежедневно, и при их содержании менее 2 106/мл добавляют свежие порции среды, суспензий клеток, обогащенных NK- или Т-клетками, с последующей инкубацией в течение не менее 2 нед по достижении периода стационарного роста клеток. Перед введением взвеси клеток реципиенту их жизнеспособность должна была быть не ниже 90 %. В случае необходимости проводят оценку цитотоксических свойств ЛАК.

Для использования в адоптивной иммунотерапии ЛИО удаляют опухоль с последующим ее измельчением и получением клеточной суспензии. После отмывания порциями среды, устранения клеточных обломков и эритроцитов в градиенте фиколлпака обогащают взвесь лимфоцитами и мононуклеарами.